DDW2023 | 庹必光/刘雪梅教授团队：泮托拉唑治肝病再出发，离子通道SLC26A家族揭秘消化系统疾病机制！

美国消化疾病周（DDW）是世界上最大和最负盛名的消化系统疾病领域专业会议。2023年5月6—9日，2023年美国消化疾病周（DDW2023）在美国芝加哥成功举行。在本次大会中，遵义医科大学附属医院消化内科庹必光、刘雪梅教授团队展现了卓越的实力，他们的研究成果分别获得了2项口头报告及4项poster展示的机会，充分展示了中国学者在该领域的杰出表现（详情点击→《DDW2023 | 刘雪梅教授：聚焦SPEM发生不同细胞起源，为胃癌癌前疾病的防控带来新观点》）。4篇poster主要聚焦泮托拉唑“老药新用”治疗肝脏疾病，并关注离子通道SLC26A家族在消化系统损伤性疾病发生中的作用及机制，为相关消化系统疾病的诊治带来新理念。在DDW2023上得到美国胃肠病协会(AGA)第101任主席Prof. Mark Donowitz的关注和认可。《中国医学论坛报》特别邀请庹必光、刘雪梅教授团队对研究进行分享，以飨读者。

作者：遵义医科大学附属医院消化内科 金海 杨新月 易志强 李靖国 刘雪梅 庹必光

目前手术切除仍然是肝细胞癌(HCC)治疗的主要手段，但是仅有HCC早期阶段的患者具有手术机会，并且HCC易转移、复发率高导致预后极差。因此，肝细胞癌的预防和有效治疗仍然是一个全球性的医学挑战。遵义医科大学附属医院消化内科庹必光教授团队一项研究发现，泮托拉唑（PPZ）能够有效抑制HCC的发生发展，并在2023 DDW年会发表了该研究结果。

体外研究显示，PPZ能够抑制肝癌细胞Huh7和Sk-Hep-1的增殖，在10 ~ 160uM范围内具有剂量依赖性，并抑制肝癌细胞中CCNA2、CCNB2、CCNE2、CDC25C、CDCA5、CDK1、CDK2、TOP2A、TTK、AURKA和BIRC5的mRNA和蛋白表达。此外，PPZ还抑制肝癌细胞糖酵解和Na⁺/H⁺交换。

裸鼠成瘤试验显示，PPZ（2、5、10 mg/kg）均能显著抑制肝癌细胞在裸鼠体内的生长。在二乙基亚硝胺(DEN) 联合 CCl4诱导小鼠肝癌模型和DEN 联合高脂饮食(HFD)诱导小鼠肝癌模型中，预防性给药（PPZ 1、2、5、10mg/kg）可显著抑制小鼠HCC发生，而治疗性给药可显著抑制HCC的生长，同时，PPZ处理的小鼠肝组织中炎症因子CXCL1、CXCL5、CXCL9、CCL2、CCL5、CCL6、CCL7、CCL20、CCL22的mRNA表达水平显著降低。另外，PPZ显著降低小鼠骨髓源性巨噬细胞、腹腔巨噬细胞和脾单核细胞中这些炎性细胞因子的mRNA表达水平并能抑制其糖酵解。

从新药开发的角度看，一种新药从临床前的筛选到临床试验的成功是相当困难的，具有高投资和低成功率的特点。“老药新用”是探索已经存在的药物新的适用范围，这种类型的药物以更快更廉价的方式进入临床试验。PPZ在临床上主要用于治疗胃酸相关性疾病，安全有效，临床使用已超30年，庹必光教授团队的这项最新研究结果为扩大PPZ的临床适用范围提供了重要证据，特别是对于HCC治疗方面。这一发现将会极大地帮助提高PPZ在医学领域的应用价值，为HCC患者提供更为有效的治疗方法。

胆汁淤积性肝病是指由于肝内外各种原因导致胆汁形成、分泌和排泄障碍引发的肝脏病变，例如原发性胆汁性胆管炎，原发性硬化性胆管炎以及进行性家族性肝内胆汁淤积。临床上病人通常会发展为肝纤维化甚至肝硬化，严重威胁着人们的身体健康。而胆汁淤积性肝病病人中疏水性胆盐的过度累积被认为促进了肝纤维化的发生。德国慕尼黑大学Simon Hohenester教授团队一直致力于胆汁淤积性肝病与胆盐的研究，此次庹必光教授团队与Simon Hohenester团队合作，共同探讨了细胞外pH值对胆盐诱导的肝星状细胞活化的影响以及针对pH环境调节对胆盐诱导的肝星状细胞活化的抑制效果。该项研究工作由遵义医科大学附属医院消化内科、德国慕尼黑大学在读博士李靖国完成。

该研究显示，标准肝星状细胞培养基的pH约为7.6，基于肝星状细胞在体内所处生理环境为轻微酸性，培养基pH被分别设置为7.6、7.5、7.4、7.3、7.2。在细胞外pH7.6~7.3的范围内，胆盐在肝星状细胞中的累积随着细胞外pH的减小而增加。此外，鹅脱氧甘胆酸（GCDCA 100μM）和鹅脱氧胆酸(CDCA 10 μM)在标准培养基（pH 7.6）并不能激活肝星状细胞（24小时刺激），但是在pH 7.3的培养基中，肝星状细胞活化标志物aSMA明显上调(1.9±0.4和1.4±0.1）。细胞内外的pH共同调节着细胞pH环境，基于此该研究发现质子泵抑制剂泮托拉唑（5、20、80 μM）能够降低细胞内pH值，明显下调aSMA的表达，从而抑制胆盐诱导的肝星状细胞活化。

研究结论认为，胆汁淤积性肝病中胆盐诱导的肝星状细胞活化很可能受到酸性微环境（Disse间隙）的调节，pH调节机制可以作为该疾病新的治疗方向。而泮托拉唑对胆汁淤积性肝纤维化的治疗作用也将在未来的研究中进一步验证。

非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)是世界范围内常见的慢性肝病，具有进行性纤维化甚至肝硬化的风险，NAFLD及其进展的机制尚未完全阐明。遵义医科大学附属医院消化内科庹必光教授团队研究发现肝脏中SLC26A6的过表达可导致小鼠肝脏脂肪变性和脂肪性肝炎，并在2023 DDW年会发表了该研究结果。

肝脏特异性过表达SLC26A6的小鼠，在6个月时自发发生肝脂肪变性，并在12个月时发生明显的肝脂肪变性、脂肪性肝炎和纤维化，而野生型小鼠则没有发生肝脂肪变性、脂肪性肝炎和纤维化。SLC26A6过表达小鼠肝脏组织中脂质基因Aacs、Acot1、Acot2、Acot3、Acot4、Acss3、Acaa1b、Cidea、CD36、Cyp2b9、Cyp4a10、Cyp4a14、Fasn、Mogat1、Osbpl3、Ppara的mRNA和蛋白表达均显著高于野生型小鼠。体外研究显示，在过表达SLC26A6人肝癌细胞Huh7细胞和正常肝细胞SQG-7701细胞中，Aacs、Acot1、Acot2、Acot3、Acot4、Acss3、Cidea、CD36、Mogat1、Osbpl3 mRNA和蛋白的表达显著增加。

NAFLD发病机制复杂，除可直接导致失代偿期肝硬化、肝细胞癌外，还可影响其他慢性肝病的进展。SLC26A6是阴离子转运通道家族的成员，其主要功能是介导上皮细胞的Cl^-/HCO^3-转运。庹必光教授团队这项研究表明，肝脏中SLC26A6的过表达可导致小鼠肝脏脂肪变性和脂肪性肝炎，这有助于了解NAFLD的发病机制，为NAFLD治疗提供新的药物靶点。

门静脉高压胃病 （PHG）以黏膜充血、水肿和糜烂为临床特征，其基本病理特征是内质网应激介导的线粒体依赖性黏膜上皮细胞凋亡。目前，临床上PHG没有特异性治疗方案，而遵义医科大学附属医院消化内科庹必光、刘雪梅教授团队发现了氯离子通道SLC26A9对PHG的黏膜损伤有重要保护作用。

研究者使用壁细胞特异性SLC26A9敲除（SLC26A9-KO）和SLC26A9野生型（SLC26A9-WT）小鼠，通过部分门静脉结扎（PVL）构建PHG动物模型，并利用组织病理学、免疫组织化学分析以及蛋白质印迹测定等方法进行研究。与正常胃黏膜组织和假手术组小鼠相比较，PHG患者及动物模型检测到SLC26A9 mRNA和蛋白水平的表达下调。与SLC26A9 WT-PVL小鼠比较，SLC26A9 KO-PVL小鼠表现出更严重的胃黏膜组织结构损伤；Tunel染色检测到SLC26A9 KO-PVL小鼠的胃上皮细胞凋亡显著增加，同时伴随着内质网应激标志物（GRP78、Caspase12、eIF2α、XBP1）和线粒体依赖性凋亡标志物（Bax、Bak、Cyt-C、Caspase 9、Caspase 3）表达的显著上调。利用重组腺相关病毒-SLC26A9过表达PHG小鼠模型黏膜中的SLC26A9基因后发现，与对照组相比较，PHG小鼠模型的组织结构损伤被显著逆转，并伴随着胃黏膜上皮细胞凋亡的显著减少和内质网应激介导的线粒体依赖性凋亡信号减弱。上述实验结果表明，Slc26a9通过下调内质网应激所介导的线粒体依赖性凋亡信号，减少胃黏膜上皮细胞凋亡，保护PHG胃黏膜防御屏障。

研究者通过靶器官动物模型水平、人体组织多个层面系统深入研究Slc26a9调控PHG黏膜损伤与修复的分子机制；阐明了Slc26a9缺失是导致PHG黏膜组织损伤进一步加重的原因。为进一步治疗PHG以及内质网应激相关疾病提供新思路、开辟新路径。